تشير السمية الخلوية إلى معدل التأثيرات السامة في الخلية الحية. يتم إجراء عدد من الاختبارات لفهم هذه النسبة. في واقع الأمر ، فإن الاختبارات التي يتم تقييمها عن طريق قياس معدل الانتشار والتأثيرات السامة في الخلية تسمى اختبارات السمية الخلوية.

يتم جمع هذه الاختبارات تحت الموضوع الرئيسي 3.

• اختبارات مع أملاح التترازوليوم
• اختبار انزيم LDH
• أنها تشكل اختبارات السمية الخلوية بما في ذلك طرق التلألؤ.

الاختبارات التي أجريت بمساعدة أملاح التترازوليوم: أملاح التترازوليوم هي مركبات عضوية غير متجانسة. تم تصنيعه وتحديده مع أكثر من أعضاء 1000 من السنوات التي تم اكتشافه فيها (Altman، 1976). جنبا إلى جنب مع الحد من أملاح التترازوليوم عن طريق أخذ الإلكترونات ، كما أنه يساعد على تحويل الفورزان إلى هيكل يسمى تغيير اللون. توجد تفاعلات الألوان فقط في الخلايا الحية. يتم إجراء اختبارات التترازوليوم على ثلاث مراحل. في المرحلة الأولى ، تتعرض الخلايا الحية لكمية معينة من المادة السامة. في الخطوة الثانية ، تتم إزالة المادة السامة من بعضها البعض ويضاف مركب التترازوليوم ويحتضن لمدة 1-4 ساعة. في المراحل الأخيرة ، يتم قياس تغير اللون بالطريقة الطيفية ويحدث تحديد عدد الخلايا الحية أو الميتة.

 اختبار إنزيم LDH: هناك طريقة أخرى مستخدمة في تحليل قابلية الخلية للخلايا وهي تحديد نشاط هيدروجيناز اللاكتات (LDH) المنطلق من الخلايا التالفة أو الميتة في الوسط. (ديكر ولومان ماتيس ، 1988 ؛ Korzeniewski و Callewaert ، 1983). يُعرف إنزيم هيدروجين اللاكتات بأنه إنزيم السيتوبلازم الموجود في جميع الخلايا. عندما تتعرض الخلايا لتأثيرات سامة ، تتعطل سلامة غشاء البلازما ويتسرب إنزيم LDH من الخلايا ويمر إلى الوسط. وبالتالي ، يتم تقييم الضرر عن طريق قياس نشاط إنزيم LDH بعد التعرض.

طرق التلألؤ:

اختبار Alamar Blue Fluorescence Test وطرق الإسفار الأخرى: استخدم اختبار Alamar blue لأول مرة من قبل أشخاص Erb و Ehlers (1950) لتحديد التلوث الجرثومي في السوائل البيولوجية والحليب ، ثم في دراسة أحمد وآخرون. (1950) تكييف هذه الاختبارات كخيار جانبي لاختبار التأسيس الثيميدين [1994 H] المشعة. تعتمد هذه الطريقة على تحويل المركب المسمى alamar blue (resazurin) إلى مركب resorufin مع الخلايا الحية. يُعرف ريزازورين باسم الأكسدة والاختزال الصباغ الأزرق ، الذي يمر بحرية عبر غشاء الخلية للدخول إلى الخلية ، حيث يتم تقليله وتحويله إلى مركب ريسوروفين وردي فلوري. لا يمكن أن تقلل الخلايا الميتة من ريزازورين وليست قادرة على توليد إشارة مضان بسبب فقدان نشاط التمثيل الغذائي. يتم الكشف عن الإشارة الناتجة عن طريق استخدام مقاييس الفلور وتزداد الشدة مع زيادة عدد الخلايا القابلة للحياة.

ATP اختبار تلألؤ بيولوجي: أدينوسين ثلاثي الفوسفات (ATP) بمثابة مصادر الطاقة مع النظم البيولوجية ويمكن العثور عليها في جميع الخلايا النشطة في التمثيل الغذائي. (كراوتش وآخرون ، 1993). بعد موت الخلية ، تختفي حالة التوليف ATP للخلية ، وتؤدي عمليات ATPase الداخلية إلى تدهور سريع للـ ATP بسهولة. لهذا السبب ، تم وصف محتوى ATP داخل الخلايا على أنه المؤشر الرئيسي لمدى صلاحية الخلية وأصبح أحد أساليب تحديد الصلاحية. تم تعريف اختبار تلألؤ بيولوجي ATP على أنه الطريقة الأسرع والأكثر حساسية والأسهل بين اختبارات الصلاحية التي أجريت على المضاعفات (Lomakina et al. ، 2015 ؛ Riss et al. ، 2006).

في الوقت الحقيقي اختبار تلألؤ بيولوجي: معظم اختبارات الصلاحية في شكل نقطة نهاية الخلايا التي لم يتم تدميرها أو السماح لمزيد من التحقيق ، مما يجعل الحركية والتحليل في الوقت الحقيقي للمواد السامة مستحيلا. نظرًا لأن السمية تعتمد على الوقت والجرعة ، لا يمكن فهم تأثيرات النطاقات المختلفة للجرعة إلا من خلال الدراسة في أوقات مختلفة. على غرار اختبار تلألؤ بيولوجي ATP ، تم استخدام إنزيم وسيفيراز أيضًا في هذا الاختبار ، ومع ذلك ، تم الحصول على إنزيم وسيفيراز المستخدم في هذا الاختبار من كائن حي مختلف. كما عملية luciferase ، يتم استخدام مادة تسمى coelenterazine.

يمكنك العمل مع مختبرنا EUROLAB لاختبارات السمية الخلوية.