Pruebas de genotoxicidad

Pruebas de genotoxicidad

La evaluación de la genotoxicidad representa un componente clave de la evaluación de seguridad de cualquier sustancia. Hay varias pruebas in vitro disponibles en diferentes etapas de desarrollo y aceptación, pero actualmente no se consideran suficientes para reemplazar las pruebas en animales necesarias para evaluar la seguridad de las sustancias. Para un desarrollo general del paradigma tradicional de pruebas de genotoxicidad, se han realizado algunas actividades nuevas. Estos incluyen mejorar las pruebas existentes, desarrollar nuevas pruebas y establecer e investigar enfoques para optimizar la precisión de las pruebas in vitro. Además, se han desarrollado herramientas útiles, como bases de datos o listas de productos químicos de referencia, para apoyar el progreso en esta área.

La evaluación de la genotoxicidad es un componente clave de la evaluación de la seguridad de los medicamentos, productos químicos industriales, pesticidas, biocidas, aditivos alimentarios, aditivos cosméticos, medicamentos veterinarios, todas las sustancias en el contexto de la legislación internacional sobre protección humana.

 Se dispone de varios ensayos in vitro bien estructurados y se han utilizado con éxito para predecir la genotoxicidad. Sin embargo, no se considera que reemplacen completamente las pruebas en animales utilizadas actualmente para evaluar la seguridad de las sustancias. Durante la última década, se han llevado a cabo importantes actividades en todo el mundo para optimizar las estrategias para las pruebas de genotoxicidad, tanto para la batería básica de pruebas in vitro como para las pruebas de seguimiento in vivo. Esto refleja el hecho de que la ciencia está progresando considerablemente y se ha adquirido una experiencia significativa en la prueba de toxicología regulatoria anual de 40 en este campo. Además, la necesidad de garantizar ensayos in vitro no produce un número elevado de resultados positivos falsos, lo que desencadena estudios in vivo innecesarios y, por lo tanto, produce efectos indeseables para el bienestar animal.

Prueba de genotoxicidad

La prueba de genotoxicidad incluye la medición del daño primario del ADN que puede repararse y, por lo tanto, reversible, así como la detección de daño fijo e irreversible (es decir, mutaciones genéticas y aberraciones cromosómicas) que pueden transmitirse a la siguiente generación cuando ocurren en las células germinales. y la perturbación en los mecanismos involucrados en el mantenimiento de la integridad del genoma. Para una evaluación adecuada de la genotoxicidad, se deben evaluar los tres puntos finales principales (mutación genética, aberraciones cromosómicas estructurales y aberraciones cromosómicas numéricas), ya que cada uno de estos eventos desempeña un papel en la carcinogénesis y las enfermedades hereditarias.

 La batería estándar para pruebas in vitro incluye análisis de mutación inversa bacteriana (OECD TG 471) in vitro, prueba de aberración cromosómica (OECD TG 473), prueba in vitro de mutación de genes de células de mamíferos (OECD TG 476 [Hprt] y TG 490 [MLA / tk]) y prueba de micronúcleo de células de mamíferos in vitro (OECD TG 487) Cualquier prueba de seguimiento in vivo confirmatoria debe cubrir el mismo punto final que los resultados positivos in vitro. Las pruebas in vivo más utilizadas hoy en día incluyen la prueba de micronúcleos de eritrocitos de mamíferos (OECD TG 474), la prueba de aberración cromosómica de la médula ósea de mamíferos (OECD TG 475), el análisis de mutación de células germinales somáticas y de roedores transgénicos (OECD TG 488) Prueba de cola alcalina (OECD TG 489).

¿Se puede mejorar el rendimiento de la prueba de genotoxicidad?

Se están buscando varias opciones para mejorar la evaluación general de la genotoxicidad. Un plan estratégico para prevenir y reducir el uso de animales en las pruebas de genotoxicidad, legislación de la UE previamente diferente, el estado de la ciencia y el ECVAM EURL (basado en las necesidades reglamentarias entre los esfuerzos más recientes y en curso realizados por varias organizaciones, incluido el ECVAM)

Hay tres pruebas recomendadas en diferentes sectores reguladores que tienen tres recomendaciones para la mutación génica bacteriana in vitro, una prueba para la inducción de la mutación génica en células de mamíferos, una prueba para una batería de prueba de inducción, una anomalía cromosómica in vitro y una prueba de micronúcleo.