Pruebas de irritacion

Pruebas de irritacion

En el contexto de la clasificación y etiquetado de peligros regulatorios, la irritación de la piel se define como la generación de daño reversible en la piel después de una exposición química definida. La prueba de irritación de la piel (SIT, por sus siglas en inglés) es una prueba in vitro no en animales diseñada para identificar sustancias químicas y mezclas (UN GHS Categoría 2 Irritante para la piel 1) que puede causar una irritación moderada de la piel y para distinguir los irritantes para la piel BM Categoría BHS 2. GHS 3 no requiere clasificación para los irritantes leves, así como el potencial de irritación de la piel.

Sistema Mundialmente Armonizado de Clasificación y Etiquetado de Productos Químicos (GHS) de las Naciones Unidas (ONU)

Este método de prueba es útil para la clasificación reglamentaria y el etiquetado de productos químicos y mezclas, y dependiendo de la jurisdicción y el marco regulatorio, los resultados de las pruebas se pueden usar de forma independiente o apoyar el peso de un enfoque de evidencia. La irritación cutánea in vivo es causada por el daño celular inducido químicamente y la cascada inflamatoria subsiguiente, este método de prueba proporciona una medida mecánicamente apropiada de la viabilidad celular en tejidos de epidermis humana reconstruida (RhE) después de un solo tratamiento químico de aplicación tópica en comparación con los tejidos tratados con control negativo. proporciona. Los productos químicos que reducen la viabilidad relativa a ≤P se clasifican como irritantes (y potencialmente corrosivos), mientras que los que producen una viabilidad relativa no se clasificarán como irritantes para la piel según la Categoría 2 de UN GHS.

EUROLAB tiene una amplia experiencia con una amplia gama de protocolos basados ​​en piel reconstruida y ha participado en estudios preliminares de validación y validación que llevan a la adopción de la Guía de Pruebas de la OCDE 439: Irritación In Vitro de la Piel: Método de Prueba de Epidermis Humana Reconstruida (TG 439).

NOTA: Dado que este método de prueba no distingue entre las categorías UN GHS 1 y 2, una predicción irritante por este método de prueba debe ir seguida de una prueba de corrosión de la piel potencial utilizando cualquiera de los métodos de prueba de corrosión aprobados. 1) Método de prueba de corrosión del monitor de tiempo de barrera de la membrana Corrositex y 2) Prueba de corrosión cutánea in vitro utilizando un modelo de epidermia humana reconstruida (RhE)

Varios otros protocolos están disponibles para evaluar la posible irritación de la piel para apoyar el desarrollo del producto, la gestión del producto, la selección de fórmulas candidatas y otras aplicaciones no regulatorias, y pueden proporcionar una clasificación de potencial de irritación de la piel. Varios protocolos permiten la evaluación de formulaciones ligeras:

1) Toxicidad de tiempo ET 50 Protocolo de detección y

2) Prueba de expresión de citoquinas para productos ligeros y para productos y mezclas de medios a corrosivos:

3) Pantalla de irritación / corrosión in vitro de la piel

Los modelos de epidermis humana (RhE) reconstruidos con 3D como EpiDerm (MatTek Corp.), epiCS (CellSystems), LabCyte EPI-MODEL (Japan Tissue Engineering Co., Ltd) y EpiSkin y SkinEthic RHE (EpiSkin SA) son modelos organotípicos in vitro de epidermis humanas. Estos materiales de prueba se pueden usar en una variedad de ensayos para evaluar la irritación dérmica, erosión, citotoxicidad, fototoxicidad y / o potencial antiinflamatorio. La viabilidad del tejido se determina utilizando el colorante vital MTT (3- (4,5-Dimetiltiazol-2-ilo) -2,5-difeniltetrazolio bromuro). La reducción de MTT en tejidos tratados con material de prueba se expresa como porcentaje de cultivos tratados con control negativo.

Los modelos de tejido EpiDerm, epiCS, LabCyte EPI-MODEL, y EpiSkin y RHE están hechos de células epiteliales humanas cultivadas en insertos de cultivo de células especialmente diseñados. Las células se diferencian para formar una epidermis totalmente diferenciada complementada con un estrato córneo funcional (ver imagen abajo). Una ventaja de usar tejidos 3-D RhE es que los materiales de prueba se aplican tópicamente sin dilución a la fuerza de la formulación completa, de modo que la mayoría de las formas de materiales de prueba se pueden aplicar a los cultivos de tal manera que ocurran in vivo.