Genotoksisuuden arviointi on keskeinen osa minkä tahansa aineen turvallisuuden arviointia. Eri in vitro -testejä on saatavilla eri kehitysvaiheissa ja hyväksymisvaiheissa, mutta niitä ei tällä hetkellä pidetä riittävinä korvaamaan eläinkokeita, jotka ovat tarpeen aineiden turvallisuuden arvioimiseksi. Perinteisen genotoksisuustestin paradigman yleistä kehittämistä varten on tehty joitakin uusia toimia. Näitä ovat olemassa olevien testien parantaminen, uusien testien kehittäminen sekä lähestymistapojen luominen ja tutkiminen in vitro -testin tarkkuuden optimoimiseksi. Lisäksi on kehitetty hyödyllisiä työkaluja, kuten tietokantoja tai vertailukemikaaliluetteloita, joilla tuetaan alan edistymistä.
Genotoksisuusarviointi on keskeinen osa lääkkeiden, teollisuuskemikaalien, torjunta-aineiden, biosidien, elintarvikelisäaineiden, kosmeettisten lisäaineiden, eläinlääkkeiden, kaikkien aineiden turvallisuuden arviointia kansainvälisen ihmisoikeuslainsäädännön yhteydessä.
Saatavilla on erilaisia hyvin strukturoituja in vitro -määrityksiä, ja niitä on käytetty onnistuneesti genotoksisuuden ennustamiseen. Niiden ei kuitenkaan katsota korvaavan täysin käytössä olevia eläinkokeita aineiden turvallisuuden arvioimiseksi. Viime vuosikymmenen aikana maailmanlaajuisesti on tehty merkittäviä toimintoja genotoksisuustestien strategioiden optimoimiseksi sekä in vitro -testiä koskevissa perusparistoissa että in vivo seurantatesteissä. Tämä heijastaa sitä tosiasiaa, että tiede etenee huomattavasti ja että 40in vuosittaisessa lainsäädännöllisessä toksikologisessa testissä on saatu merkittävää kokemusta tällä alalla. Lisäksi tarve varmistaa in vitro -määritykset ei tuota suurta määrää vääriä positiivisia tuloksia, mikä laukaisee tarpeettomia in vivo -tutkimuksia, mikä aiheuttaa haitallisia vaikutuksia eläinten hyvinvointiin.
Genotoksisuuden testi
Genotoksisuustestissä on mitattu DNA: n ensisijaisia vaurioita, jotka voidaan korjata ja siten palauttaa, sekä havaitaan kiinteät ja peruuttamattomat vauriot (eli geenimutaatiot ja kromosomipoikkeamat), jotka voidaan siirtää seuraavalle sukupolvelle, kun ne esiintyvät itusoluissa. ja häiriöt geenin eheyden ylläpitämiseen liittyvissä mekanismeissa. Genotoksisuuden riittävää arviointia varten on arvioitava kolme päätavoitetta (geenimutaatio, rakennekromosomipoikkeamat ja numeeriset kromosomipoikkeamat), koska jokaisella näistä tapahtumista on merkitystä karsinogeneesissä ja perinnöllisissä sairauksissa.
In vitro -standardin vakiovaruste sisältää bakteeri-käänteismutaation analyysin (OECD TG 471) in vitro, kromosomipoikkeamatesti (OECD TG 473), nisäkässolujen geenimutaatiotesti (OECD TG 476 [Hprt] ja TG 490 [MLA / tk]) ja nisäkässolujen mikronukleustestin in vitro (OECD TG 487) Minkä tahansa vahvistavan in vivo seurantatestin tulisi kattaa sama päätepiste kuin in vitro positiiviset tulokset. Yleisimmin käytetty in vivo -testejä ovat nisäkkäiden erytrosyyttien mikronukleustestit (OECD TG 474), nisäkkään luuytimen kromosomipoikkeamatesti (OECD TG 475), siirtogeeninen jyrsijän somaattinen ja itusolujen geenimutaatioanalyysi (OECD TG 488) ja in vivo emäksinen testi (OECD TG 489).
Voiko genotoksisuustestin suorituskykyä parantaa?
Genotoksisuuden yleisen arvioinnin parantamiseksi pyritään parantamaan useita vaihtoehtoja. Strateginen suunnitelma eläinten käytön ehkäisemiseksi ja vähentämiseksi genotoksisuuden testauksessa, aiemmin erilaiset EU: n säädökset, tieteen tila ja EURL ECVAM (perustuvat eri organisaatioiden, myös ECVAM: n, viimeisimpien ja jatkuvien ponnistelujen tarpeisiin)
Erilaisilla sääntelyaloilla on kolme suositeltavaa testiä, joissa on kolme suositusta bakteriaalisen geenimutaation in vitro, geenimutaation induktiotesti nisäkässoluissa, testi induktiotestiä varten, kromosomaalinen poikkeama in vitro ja mikrosukutesti.