Tests de charge microbienne

Tests de charge microbienne

Le test de comptage microbien, également appelé test de charge biologique ou test de charge microbienne, est effectué pour contrôler la matière première, les échantillons de processus et le contenu microbiologique dans les industries des produits pharmaceutiques, biologiques, cosmétiques, nutritionnels et des dispositifs médicaux. . La FDA s'attend à ce que les entreprises surveillent la charge de la charge biologique sur les produits utilisés pour les humains et les animaux. Le test de charge biologique peut être effectué de plusieurs manières, en fonction de la nature du matériau testé.

 Une liste des méthodes d'extraction présentées ci-dessous. La méthode d'extraction est la procédure permettant d'éliminer les micro-organismes du produit testé.

 ⦁ Immersion

 ⦁ Lavage / Rinçage

 ⦁ Échantillonnage de surface

 ⦁ dilution

 Une liste des méthodes de numérotation présentées ci-dessous. La méthode de numérotation est la procédure utilisée pour déterminer le nombre de microorganismes viables extraits du produit testé.

 ⦁ Filtration membranaire

 ⦁ Revêtement direct

 ⦁ Nombre le plus probable (MPN)

 Le test de charge microbienne doit être vérifié pour s'assurer que la méthode est efficace, précise et reproductible pour déterminer la charge microbienne du matériau dans un produit à tester. La méthodologie la plus appropriée doit être identifiée dans le cadre du développement de la méthode. La vérification sera effectuée par la méthode montrant la meilleure récupération des organismes sans aucune inhibition. La validation est effectuée selon USP / EP pour les produits pharmaceutiques ou de biotechnologie et AAMI pour les dispositifs médicaux. Les cosmétiques sont testés selon le guide BDA de la FDA.

 Le MQA peut également développer des procédures de bio-incinération spécifiques pour les échantillons difficiles à analyser.

 PROCÉDÉS DE DÉTERMINATION DE NOMBRE MICROBIEN TOTAL

 Une fois l’échantillon préparé, plusieurs méthodes sont disponibles pour déterminer le nombre total de cellules de l’aliment. Nombre de ces méthodes permettent également de compter des groupes bactériens importants tels que les coliformes. Quelques personnes peuvent vous permettre de compter le nombre de germes d'un genre particulier, tel que Salmonella. 1. Nombre de plaques standard (CPS) La méthode la plus couramment utilisée pour déterminer le nombre d'unités formant des colonies (UFC) dans un aliment. Utilisez une plaque de frottis ou de déversement contenant un échantillon d’aliments homogénéisé (les psychrotrophes peuvent ne pas survivre sur les plaques de déversement). L’incubation est une séance d’aérobic heure 35 ± 48 à 2 o C. Nombre de plaques APC-aérobies - cellules aérées à la surface de la gélose et incubées en aérobiose.

 avantage:

  1. Facile à réaliser
  2. AOAC (Association officielle des chimistes analytiques) approuvée pour de nombreux aliments

 inconvénients:

  1. Les résultats ne sont pas disponibles pendant au moins 16-18 heures (généralement plus longues).
  2. Les comptages dans un aliment sont influencés par plusieurs facteurs, notamment:
  3. Méthode d'échantillonnage et distribution de MO dans les denrées alimentaires
  4. La nature de la flore alimentaire (prend principalement des aérobies mésophiles et des aérobies)
  5. Nature de la nourriture
  6. Les paramètres internes du milieu de croissance reflètent le MO perçu.
  7. Temps d'incubation et température (paramètres externes)
  8. Antagonisme microbien entre espèces alimentaires
  9. Compteur de plaques en spirale - Une version automatique du SPC est une plaque en spirale (un bras distributeur qui agit uniquement comme une aiguille sur un recul), un dispositif qui distribue un volume de liquide en diminution constante sur une seule plaque d'agar rotative. La gélose est ensuite incubée et comptée. 10 sur une seule plaque peut fournir efficacement jusqu’à la plage de concentration 5, mais la numérotation nécessite une grille de comptage spéciale.

 Avantages par rapport à la CPS:

  1. Facile à effectuer (peu de formation requise)
  2. Moins de matériel utilisé (plaques d'agar, cavités de dilution, pipettes)
  3. 3-4 X peut analyser plus d'échantillons par heure
  4. Le revêtement en spirale est une méthode AOAC bien comprise avec les valeurs SPC.

 Inconvénient:

  1. Les particules d'aliments peuvent obstruer le bras de distribution - plus approprié pour les liquides tels que le lait
  2. Petrifilm sec

 Iki Deux films plastiques maintenus ensemble sur un côté et recouverts d'un sandwich

 Composants de milieux de culture, colorant tétrazolium (colorant décroissant) et eau