In de context van wettelijke gevarenclassificatie en -etikettering wordt huidirritatie gedefinieerd als de productie van omkeerbare schade aan de huid na een geïdentificeerde chemische blootstelling. De Skin Irritation Test (SIT) is een in-vitro test waarbij geen dieren worden gebruikt om chemicaliën en mengsels te identificeren die matige huidirritatie kunnen veroorzaken (VN GHS Categorie 2 Huidirriterend 1) en om UN GHS Categorie 2 Huidirriterende stoffen te onderscheiden van UN. GHS 3 licht irriterende stoffen en stoffen waarvoor geen classificatie voor mogelijk huidirritatie nodig is.

Verenigde Naties (VN) Wereldwijd geharmoniseerd systeem voor classificatie en etikettering van chemicaliën (GHS)

Deze testmethode is nuttig voor de wettelijke classificatie en etikettering van chemicaliën en mengsels en, afhankelijk van de wettelijke jurisdictie en het kader, kunnen testresultaten onafhankelijk worden gebruikt of een op bewijskracht gebaseerde aanpak ondersteunen. Aangezien huidirritatie in vivo doorgaans wordt veroorzaakt door chemisch geïnduceerde celbeschadiging en daaropvolgende ontstekingscascade, biedt deze testmethode een mechanisch relevante meting van de cellevensvatbaarheid in weefsels van gereconstrueerde menselijke epidermis (RhE) na een enkele plaatselijk aangebrachte chemische behandeling in vergelijking met weefsels die zijn behandeld met negatief controle. biedt. Chemicaliën die de relatieve levensvatbaarheid verminderen tot ≤P worden geclassificeerd als irriterende stoffen (en potentieel bijtend), terwijl stoffen die resulteren in relatieve levensvatbaarheid, P, niet worden geclassificeerd als huidirriterende stoffen volgens VN-GHS-categorie 2.

EUROLAB heeft uitgebreide expertise met een breed scala aan gereconstrueerde huidgebaseerde protocollen en heeft deelgenomen aan de prevalidatie- en validatiestudies die hebben geleid tot de goedkeuring van OESO-testrichtlijn 439: In Vitro Skin Irritation: Reconstructed Human Epidermis Test Method (TG 439) .

OPMERKING: Aangezien deze testmethode geen onderscheid maakt tussen UN GHS-categorieën 1 en 2, moet een irriterende schatting met deze testmethode worden gevolgd door een mogelijke huidafschuringstest met behulp van een van de goedgekeurde corrosietestmethoden. 1) Corrositex-membraanbarrière Tijdmonitor Corrosietestmethode en 2) In-vitro huidcorrosietest met behulp van het gereconstrueerde menselijke epidermis (RhE)-model

Er zijn verschillende andere protocollen beschikbaar om mogelijke huidirritatie te beoordelen ter ondersteuning van productontwikkeling, productbeheer, selectie van kandidaatformuleringen en andere niet-regelgevende toepassingen en kunnen een mogelijke rangorde voor huidirritatie opleveren. Verschillende protocollen maken evaluatie van milde formuleringen mogelijk:

1) Tijd Toxiciteit ET 50 Screeningsprotocol en

2) Cytokine-expressietest voor milde producten en voor matig tot bijtende producten en mengsels:

3) In vitro huidirritatie-/corrosiescherm

3D gereconstrueerde menselijke epidermis (RhE) modellen zoals EpiDerm (MatTek Corp.), epiCS (CellSystems), LabCyte EPI-MODEL (Japan Tissue Engineering Co, Ltd) en EpiSkin en SkinEthic RHE (EpiSkin SA) zijn organotypische in vitro modellen van menselijke epidermis kan worden gebruikt in een verscheidenheid aan assays om huidirritatie, slijtage, cytotoxiciteit, fototoxiciteit en/of ontstekingsremmend vermogen van deze testmaterialen te evalueren. Levensvatbaarheid in weefsels wordt bepaald met behulp van de vitale kleurstof MTT (3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-difenyltetrazoliumbromide). De vermindering van MTT in met testmateriaal behandelde weefsels wordt uitgedrukt als een percentage ten opzichte van met negatieve controle behandelde kweken.

EpiDerm-, epiCS-, LabCyte EPI-MODEL- en EpiSkin- en RHE-weefselmodellen zijn gemaakt van menselijke epitheelcellen die zijn gekweekt op speciaal ontworpen celkweekinserts. De cellen differentiëren zich tot een volledig gedifferentieerde epidermis, compleet met een functioneel stratum corneum (zie onderstaande afbeelding). Een voordeel van het gebruik van 3D-RhE-tissues is dat de testmaterialen topisch worden aangebracht, op volledige formuleringssterkte, zonder verdunning, zodat de meeste vormen van testmaterialen kunnen worden aangebracht op culturen zoals ze in vivo voorkomen.