De microbiële tellingstest, ook wel de biologische belastingtest of microbiële belastingtest genoemd, wordt uitgevoerd om de grondstof, procesmonsters en microbiologische inhoud in de farmaceutische, biologische, cosmetische, voedingsproducten en medische apparaatindustrieën te controleren. . De FDA verwacht van bedrijven dat ze de last van biologische belasting op producten die voor mens en dier worden gebruikt, controleren. De biologische belastingtest kan op verschillende manieren worden uitgevoerd, afhankelijk van de aard van het geteste materiaal.
Een lijst met extractiemethoden die hieronder worden gepresenteerd. De extractiemethode is de procedure voor het verwijderen van micro-organismen uit het geteste product.
⦁ Onderdompeling
⦁ Wassen / spoelen
⦁ Surface Sampling
⦁ verdunning
Een lijst met de nummeringsmethoden die hieronder worden weergegeven. De nummeringsmethode is de procedure die wordt gebruikt om het aantal levensvatbare micro-organismen te bepalen dat wordt geëxtraheerd uit het geteste product.
⦁ Membraanfiltratie
⦁ Directe coating
⦁ Meest waarschijnlijk nummer (MPN)
De microbiële belastingtest moet worden geverifieerd om te verzekeren dat de methode effectief, nauwkeurig en reproduceerbaar is bij het bepalen van de microbiële belasting van materiaal in een testproduct. De meest geschikte methodologie moet worden geïdentificeerd als onderdeel van de methodeontwikkeling. Verificatie zal worden uitgevoerd door de methode die het beste herstel van de organismen zonder enige remming toont. Validatie wordt uitgevoerd per USP / EP voor farmaceutische of biotechnologische producten en AAMI voor medische apparaten. Cosmetica worden getest volgens de BAM-gids van de FDA.
De MQA kan ook specifieke bio-verbrandingsprocedures ontwikkelen voor monsters die moeilijk te testen zijn.
METHODEN VOOR HET BEPALEN VAN TOTALE MICROBIËLE AANTALLEN
Nadat het monster is bereid, zijn er verschillende methoden beschikbaar om het totale aantal cellen in het voedsel te bepalen. Veel van deze methoden maken ook het tellen van belangrijke bacteriegroepen zoals coliformen mogelijk. Een paar mensen kunnen u toestaan om het aantal kiemen van een bepaald geslacht te tellen, zoals Salmonella. 1. Standaardplaatentelling (SPC) De meest gebruikte methode voor het bepalen van het aantal kolonievormende eenheden (CFU's) in een voedingsmiddel. Gebruik een uitstrijkje of morsplaat met een gehomogeniseerd voedselmonster (psychrotrofen overleven mogelijk niet op morsplaten). Incubatie is 35 ± 48 uur aerobics op 2 o C. Aantal APC-aërobe platen - cellen belucht op het agaroppervlak en aëroob geincubeerd.
voordeel:
- Eenvoudig uit te voeren
- AOAC (Official Association of Analytical Chemists) goedgekeurd voor veel voedingsmiddelen
nadelen:
- Resultaten zijn niet beschikbaar voor minimaal 16-18 uur (meestal langer).
- Tellingen in een voedsel worden beïnvloed door verschillende factoren, waaronder:
- Bemonsteringsmethode en MO-verdeling in levensmiddelen
- De aard van de voedselflora (neemt meestal mesofiele aeroben en aerobes)
- Aard van voedsel
- De interne parameters van het groeimedium weerspiegelen de waargenomen MO.
- Incubatietijd en -temperatuur (externe parameters)
- Microbieel antagonisme onder voedselsoorten
- Spiraalplaat-teller - Een automatische versie van de SPC is een spiraalplaat (een afgiftehouder die alleen als een naald op een terugslag werkt), een apparaat dat een continu afnemend vloeistofvolume verdeelt over een enkele roterende agarplaat. De agar wordt vervolgens geïncubeerd en geteld. 10 op een enkele plaat kan effectief tot aan het 5-concentratiebereik leveren, maar de nummering vereist een speciaal telpatroon.
Voordelen ten opzichte van SPC:
- Eenvoudig uit te voeren (weinig training vereist)
- Minder materiaal gebruikt (agarplaten, verdunningsholten, pipetten)
- 3-4 X kan meer samples per uur uitvoeren
- Spiraalcoating is een AOAC-methode die goed wordt begrepen met SPC-waarden.
nadeel:
- Voedseldeeltjes kunnen de uitschenkarm verstoppen - meer geschikt voor vloeistoffen zoals melk
- Droge petrifilm
Iki Twee plastic films aan één kant bij elkaar en bedekt met een boterham
⦁ componenten van kweekmedia, tetrazoliumkleurstof (afnemende kleurstof) en water