Test zliczania drobnoustrojów, zwany również testem obciążenia biologicznego lub testem obciążenia mikrobiologicznego, jest wykonywany w celu monitorowania surowców, próbek procesu i zawartości mikrobiologicznej w przemyśle farmaceutycznym, biologicznym, kosmetycznym, odżywczym i urządzeń medycznych. , FDA oczekuje, że firmy będą monitorować obciążenie związane z obciążeniem biologicznym produktami stosowanymi u ludzi i zwierząt. Test obciążenia biologicznego można przeprowadzić na kilka sposobów, w zależności od rodzaju badanego materiału.
Lista metod ekstrakcji przedstawiona poniżej. Metoda ekstrakcji to procedura usuwania mikroorganizmów z testowanego produktu.
Ersion Zanurzenie
⦁ Mycie / płukanie
⦁ Próbkowanie powierzchniowe
Ution rozcieńczenie
Lista metod numerowania przedstawionych poniżej. Metoda numerowania to procedura stosowana do określenia liczby żywych mikroorganizmów wyodrębnionych z testowanego produktu.
⦁ Filtracja membranowa
Coating Bezpośrednia powłoka
⦁ Most Likely Number (MPN)
Test obciążenia mikrobiologicznego należy zweryfikować, aby upewnić się, że metoda jest skuteczna, dokładna i odtwarzalna przy określaniu obciążenia mikrobiologicznego materiału w produkcie testowym. Najbardziej odpowiednią metodologię należy zidentyfikować jako część rozwoju metody. Weryfikacja zostanie przeprowadzona metodą pokazującą najlepszy odzysk organizmów bez żadnego hamowania. Walidacja jest przeprowadzana według USP / EP dla produktów farmaceutycznych lub biotechnologicznych, a AAMI dla wyrobów medycznych. Kosmetyki są testowane według przewodnika FDA BAM.
MQA może również opracować specjalne procedury spalania biologicznego dla próbek, które są trudne do testowania.
METODY OKREŚLANIA CAŁKOWITYCH LICZB MIKROBIALNYCH
Po przygotowaniu próbki dostępnych jest kilka metod określania całkowitej liczby komórek w żywności. Wiele z tych metod umożliwia również liczenie ważnych grup bakterii, takich jak bakterie grupy coli. Kilka osób może zezwolić na policzenie liczby zarazków danego rodzaju, takich jak Salmonella. 1. Standardowa liczba płytek (SPC) Najczęściej stosowana metoda określania liczby jednostek tworzących kolonie (CFU) w żywności. Użyj rozmazu lub płytki rozlewu zawierającej homogenizowaną próbkę żywności (psychrotrofy mogą nie przetrwać na płytkach rozlewu). Inkubacja to aerobik 35 ± 48 w 2 o C. Liczba płytek aerobowych APC - komórki napowietrzone na powierzchni agaru i inkubowane w warunkach tlenowych.
zaleta:
- Łatwy do wykonania
- AOAC (oficjalne stowarzyszenie chemików analitycznych) zatwierdzone dla wielu produktów spożywczych
wady:
- Wyniki nie są dostępne przez co najmniej 16-18 godzin (zwykle dłużej).
- Na ilość żywności wpływa kilka czynników, w tym:
- Metoda pobierania próbek i rozkład MO w środkach spożywczych
- Natura flory pokarmowej (najczęściej przyjmuje mezofilne tlenowce i tlenowce)
- Natura żywności
- Wewnętrzne parametry podłoża wzrostowego odzwierciedlają postrzegane MO.
- Czas i temperatura inkubacji (parametry zewnętrzne)
- Antagonizm mikrobiologiczny wśród gatunków żywności
- Spiral Plate Counter - automatyczna wersja SPC to spiralna płytka (ramię dozujące, które działa tylko jako igła odrzutu), urządzenie, które rozprowadza stale malejącą objętość cieczy na pojedynczej obrotowej płytce agarowej. Agar jest następnie inkubowany i liczony. 10 na pojedynczej płycie może skutecznie dostarczać do zakresu stężenia 5, ale numeracja wymaga specjalnej siatki zliczającej.
Zalety w stosunku do SPC:
- Łatwy do wykonania (wymagane niewielkie szkolenie)
- Mniej użytego materiału (płytki agarowe, wnęki do rozcieńczania, pipety)
- 3-4 X może wykonywać więcej próbek na godzinę
- Powłoka spiralna jest metodą AOAC, która jest dobrze zrozumiana dzięki wartościom SPC.
Wada:
- Cząsteczki żywności mogą zatkać ramię dozujące - bardziej odpowiednie dla płynów, takich jak mleko
- Dry Petrifilm
Iki Dwie plastikowe folie trzymane razem z jednej strony i przykryte kanapką
⦁ składniki pożywek hodowlanych, barwnik tetrazolowy (barwnik malejący) i woda