Тест на микробное количество, также называемый тестом на биологическую нагрузку или тест на микробную нагрузку, проводится для мониторинга сырья, технологических образцов и микробиологического содержимого в фармацевтической, биологической, косметической, пищевой промышленности и в производстве медицинских устройств. , FDA ожидает, что компании будут контролировать бремя биологической нагрузки на продукты, используемые для людей и животных. Испытание на биологическую нагрузку можно проводить несколькими способами, в зависимости от природы испытуемого материала.
Список методов извлечения представлен ниже. Метод экстракции - это процедура удаления микроорганизмов из тестируемого продукта.
Mers погружение
⦁ стирка / полоскание
⦁ Выборка поверхности
⦁ разбавление
Список методов нумерации представлен ниже. Метод нумерации - это процедура, используемая для определения количества жизнеспособных микроорганизмов, выделенных из тестируемого продукта.
⦁ Мембранная фильтрация
⦁ Прямое покрытие
⦁ Наиболее вероятное число (MPN)
Тест на микробную нагрузку должен быть проверен, чтобы гарантировать, что метод эффективен, точен и воспроизводим при определении микробной нагрузки материала в исследуемом продукте Наиболее подходящая методология должна быть определена как часть разработки метода. Проверка будет проводиться методом, показывающим лучшее восстановление организмов без какого-либо ингибирования. Валидация выполняется в соответствии с USP / EP для фармацевтических продуктов или продуктов биотехнологии и AAMI для медицинских устройств. Косметика проверена согласно руководству FDA BAM.
MQA может также разработать специальные процедуры био-сжигания для образцов, которые трудно проверить.
МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВСЕГО МИКРОБНЫХ ЧИСЕЛ
Как только образец подготовлен, доступно несколько методов для определения общего количества клеток в пище. Многие из этих методов также позволяют считать важные бактериальные группы, такие как колиформы. Несколько человек могут позволить вам подсчитать количество микробов определенного рода, например сальмонеллы. 1. Стандартный подсчет пластин (SPC) Наиболее часто используемый метод определения количества колониеобразующих единиц (КОЕ) в пище. Используйте мазок или разливную пластинку, содержащую гомогенизированный образец пищи (психротрофы могут не выжить на разлитых пластинах). Инкубация - 35 ± 48, часовая аэробика при 2 o C. Количество APC-аэробных пластинок - клетки, аэрированные на поверхности агара и инкубированные аэробно.
Преимущество:
- Легко выполнить
- AOAC (Официальная ассоциация аналитических химиков) одобрен для многих продуктов
Недостатки:
- Результаты не доступны в течение по крайней мере 16-18 часов (обычно дольше).
- На количество пищи влияют несколько факторов, в том числе:
- Метод отбора проб и распределение МО в пищевых продуктах
- Характер пищевой флоры (в основном мезофильные аэробы и аэробы)
- Природа еды
- Внутренние параметры ростовой среды отражают воспринимаемое МО.
- Время и температура инкубации (внешние параметры)
- Микробный антагонизм среди пищевых видов
- Счетчик спиральных тарелок - автоматическая версия SPC представляет собой спиральную тарелку (дозирующий рычаг, который действует только как игла при отдаче), устройство, которое распределяет непрерывно уменьшающийся объем жидкости на одной вращающейся пластине агара. Затем агар инкубируют и подсчитывают. 10 на одной пластине может эффективно доставлять до диапазона концентраций 5, но для нумерации требуется специальная счетная сетка.
Преимущества перед SPC:
- Простота выполнения (требуется небольшая подготовка)
- Меньше используемого материала (чашки с агаром, полости для разбавления, пипетки)
- 3-4 X может запускать больше выборок в час
- Спиральное покрытие представляет собой метод AOAC, который хорошо понятен при значениях SPC.
Неудобство:
- Частицы пищи могут засорить дозатор - больше подходит для жидкостей, таких как молоко
- Сухой Petrifilm
Iki Две пластиковые пленки, скрепленные с одной стороны и покрытые сэндвичем
⦁ компоненты питательных сред, тетразолиевый краситель (восстанавливающий краситель) и вода