細胞毒性測試

細胞毒性測試實驗室

細胞毒性是指活細胞中毒性作用的速率。 為了理解這個比例,我們進行了許多測試。 事實上,通過測量細胞中的增殖速率和毒性效應來評估的測試稱為細胞毒性測試。

這些測試是在主題3下收集的。

  • 用四唑鹽測試
  • LDH酶釋放試驗
  • 它們形成細胞毒性測試,包括發光方法。

借助四唑鹽進行的試驗:四唑鹽是雜環有機化合物。 它的合成和識別超過了1000成員發現的年代(Altman,1976)。 隨著通過吸收電子來減少四唑鹽,它還有助於將甲烷轉化為稱為顏色變化的結構。 顏色反應僅存在於活細胞中。 四唑試驗分三個階段進行。 在第一階段,活細胞暴露於一定量的有毒物質。 在第二步中,將有毒物質彼此除去,加入四唑鎓化合物並孵育1-4小時。 在最後階段,通過分光光度法測量顏色變化並確定活細胞或死細胞的數量。

 LDH酶釋放測試:用於分析細胞活力的另一種方法是測定從受損或死細胞釋放到培養基中的乳酸脫氫酶(LDH)活性。 (Decker和Lohmann-Matthes,1988; Korzeniewski和Callewaert,1983)。 乳酸脫氫酶被稱為在所有細胞中發現的細胞質酶。 當細胞暴露於毒性作用時,它們的質膜完整性被破壞,並且LDH酶從細胞中洩漏並傳遞到培養基。 因此,通過測量暴露後的LDH酶活性來進行損傷評估。

發光方法:

Alamar藍熒光測試和其他熒光方法:Ermar和Ehlers(1950)人員首次使用Alamar藍測試來測定生物液體和牛奶中的細菌污染,後來在Ahmed等人的研究中。 (1950)將這些測試作為放射性[1994 H]胸苷摻入試驗的側面選擇。 該方法基於將稱為阿拉瑪藍(刃天青)的化合物與活細胞一起轉化為試鹵靈化合物。 Resazurine被稱為氧化藍染料氧化還原劑,它自由地通過細胞膜進入細胞,在那裡它被還原並轉化成熒光粉紅色的試鹵靈化合物。 死細胞不能減少刃天青,並且由於代謝活性的喪失而不能產生熒光信號。 通過使用熒光計檢測所得到的信號,並且隨著活細胞數量的增加,強度增加。

ATP生物發光測試:三磷酸腺苷(ATP)鼴鼠充當生物系統的能量來源,可以在所有代謝活躍的細胞中找到。 (Crouch等,1993)。 細胞死亡後,細胞的ATP合成狀態消失,內源性ATP酶迅速降解ATP。 由於這個原因,細胞內ATP含量已被描述為細胞活力的主要指標,並且它正成為活力測定方法之一。 ATP生物發光測試已被定義為以倍數進行的生存力測試中最快,最靈敏和最簡單的方法(Lomakina等,2015; Riss等,2006)。

實時生物發光測試:大多數活力測試採用終點格式,其細胞未被破壞或允許進一步研究,無法對有毒物質進行動力學和實時分析。 由於毒性是時間和劑量依賴性的,因此不同劑量範圍的影響只能通過在不同時間內研究來理解。 與ATP生物發光測定類似,熒光素酶也用於該測定中。然而,該測定中使用的熒光素酶是從不同的生物體獲得的。 作為熒光素酶過程,使用稱為腔腸素的物質。

您可以與我們的實驗室EUROLAB一起進行細胞毒性測試。